詳細介紹
培養基 | 98%EMEM+2%FBS |
生長條件 | 培養溫度37℃;培養時間3-5天;氣體環境5%CO2+95%空氣; |
存儲條件 | -20℃ |
安全等級 | 2 |
分離基物 | 人腺病毒11菌株Slobitski是在馬薩諸塞州從人糞便中分離出來的。 |
操作步驟 | ①宿主細胞KB培養 將凍存細胞復蘇至T25瓶中培養,在培養溫度37℃、氣體環境5%CO2+95%空氣的培養條件下培養3天密度可達到80%,此時接種病毒。 ②病毒接種 將人腺病毒12型置于37℃水浴鍋中溶解。將密度達到80%的KB細胞去除細胞培養基后,用PBS輕輕潤洗1-2遍以去除殘留培養基。將1ml病毒液接種到宿主細胞中,在37℃、5%CO2+95%空氣的條件下吸附1-2小時,每15分鐘輕輕搖動一次T25瓶,使病毒分布更加均勻。 ③病毒培養 吸附結束后,通過添加6-8mL病毒生長培養基結束吸附。置于培養箱中進行培養2-4天。期間需要每日觀察,當宿主細胞全部產生病變后開始收集病毒。 ④病毒液收集 收獲時將細胞反復凍融2次,然后用0.22μm孔徑過濾器收集病毒。 |
應用領域 | 本質控品適用于腺病毒11型核酸檢測試劑盒的靈敏度檢測、特異性分析,以及其他病毒核酸相關研究。 |
共享方式 | 公益性共享 |
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