<培養(yǎng)細(xì)胞>

　　培養(yǎng)細(xì)胞總是會(huì)讓科研小白茶飯不思，擔(dān)驚受怕，即使大好春光出去陪美眉或者小哥哥，也會(huì)牽腸掛肚，心不在焉。

　　萬(wàn)一污染了又要看到師兄師姐鄙視的目光，嫌棄的嘴角，還有因?yàn)槲廴驹斐善渌麘?zhàn)友的驚恐不安，想想都怕怕。

　　師姐A：師妹！！！讓你養(yǎng)著玩的細(xì)胞又污染了。

　　師姐B：納尼？！

　　師姐C（火速趕往案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)）：我的心肝寶貝細(xì)胞你還好么？

　　師兄A:天啊！！！并致電女票：“親愛(ài)的，晚上不能陪你了，新來(lái)的師妹細(xì)胞又污染了，我又要給培養(yǎng)箱滅菌了”。

　　師妹：我是罪人，好丟臉。像我這樣的小白如何避免細(xì)胞污染呢？

　　“師妹過(guò)來(lái)，師兄手把手教你，如何預(yù)防細(xì)胞污染。” 想當(dāng)年師兄就是靠養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)起來(lái)的重度潔癖。

　　常規(guī)操作不再贅述，主要安利以下內(nèi)容：

　　1. 仔細(xì)閱讀所在實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞室綜合管理制度，嚴(yán)格遵守制度。

　　2. 細(xì)胞室室內(nèi)滅菌可以交叉進(jìn)行，熏蒸、臭氧、紫外、新潔爾滅。

　　3. 根據(jù)細(xì)胞室空間，限制同時(shí)進(jìn)入人數(shù)。

　　4. 超凈工作臺(tái)使用前后，紫外燈照射滅菌。使用前、后需用酒精棉球擦拭工作區(qū)消毒（小竅門：超凈臺(tái)使用完畢后，可以用酒精噴灑桌面，再用抽紙擦干凈，比用酒精棉球干凈多嘍！使用前不建議這種方法擦拭）。物品放入超凈臺(tái)前均應(yīng)酒精噴灑消毒，超凈臺(tái)內(nèi)嚴(yán)禁堆放過(guò)多物品，以免影響風(fēng)路平衡。

　　5. 水浴鍋使用完畢后及時(shí)將水倒掉，并保持鍋內(nèi)干燥。常用水浴鍋時(shí)，每周將水浴鍋中的水至少煮沸一次，以防細(xì)菌滋生。

　　6. 從培養(yǎng)箱取放細(xì)胞前，用酒精清潔雙手（或手套），盡量縮短開(kāi)門時(shí)間和減少開(kāi)門次數(shù)。培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精揮發(fā)后再放入，以免培養(yǎng)箱內(nèi)滯留過(guò)多乙醇蒸氣。

　　7. 培養(yǎng)箱用水每周更換一次，更換前托盤用酒精擦拭、紫外燈照射30分鐘殺菌。

　　8. 滅完菌槍頭，烘箱烘干后存放，保質(zhì)期1周。逾期需重新滅菌使用。

　　9. 培養(yǎng)液、胰酶、PBS等試劑盡量不和別人共用，應(yīng)單獨(dú)分裝使用，以免交叉污染，也便污染后自查原因。

　　10.在使用0.22μm的微孔濾膜過(guò)濾自配溶液時(shí)，注意無(wú)菌操作規(guī)范，以防濾液污染。特殊情況可檢菌安全后使用。

　　11.除特殊要求外，建議培養(yǎng)基中添加雙抗，算是送給細(xì)胞的守護(hù)神。

　　12.防護(hù)服、口罩、手套缺一不可。隔壁細(xì)胞室負(fù)責(zé)人是韓國(guó)回來(lái)的博士，讓學(xué)生只戴手套操作，于是經(jīng)常聽(tīng)他們說(shuō)細(xì)胞掛了。

　　13.操作前，準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)所需物品，以減少走動(dòng)；物品需有序擺放在超凈臺(tái)觸手可及的地方，同時(shí)空留足夠操作空間。

　　14.操作時(shí)，試劑不用盡量及時(shí)蓋上蓋子，移至操作區(qū)外圍，盡量不要從開(kāi)口容器上經(jīng)過(guò)。

　　15.使用移液槍時(shí)，將容器傾斜以便于移液，切勿將槍桿碰觸瓶口及內(nèi)壁。一旦發(fā)生倒吸情況，要及時(shí)用酒精棉球擦拭，以免液體殘留導(dǎo)致細(xì)菌滋生。

　　16.先取試劑、耗材，再取移液槍、安槍頭。很多人習(xí)慣先安槍頭，然后去拿試劑、耗材，殊不知無(wú)意間槍頭已經(jīng)觸碰其他地方導(dǎo)致污染。

　　17.向廢液缸打廢液時(shí)，需輕柔，以免造成水花四濺，污染槍頭、槍體。實(shí)驗(yàn)結(jié)束，及時(shí)倒掉廢液缸垃圾，沖洗之后噴灑酒精，放入超凈臺(tái)紫外照射殺菌。

　　18.培養(yǎng)基滴在桌面時(shí)要及時(shí)用酒精棉球擦拭，切記不要等實(shí)驗(yàn)做完再處理。因?yàn)槟菢樱愕呐_(tái)面上就會(huì)留下一個(gè)印記，對(duì)于強(qiáng)迫癥的人來(lái)說(shuō)，不！能！接！受！！！！

　　19.凍存細(xì)胞時(shí)凍存管蓋子需擰緊。復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)，從液氮罐取出凍存管，輕擰蓋子，以確認(rèn)蓋子是否擰緊。鑷子夾住凍存管蓋子與管體交界處，在37度水浴鍋中快速解凍，水面不可超過(guò)凍存管蓋沿；不建議直接扔進(jìn)水中，以免水滲入造成污染。

　　20.一旦污染，及時(shí)處理，不到不得已不建議施救；查找原因，防止再犯。

　　總的來(lái)說(shuō)，防患未然比亡羊補(bǔ)牢強(qiáng)得多。操作過(guò)程中對(duì)于模糊不清的，寧愿認(rèn)為是有菌的棄掉，也不要心存僥幸！